产品货号：
BTN130609
中文名称：
一步式RT-PCR Mix
英文名称：
One-Step RT-PCR Mix
产品规格：
1mL
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
本产品是高效cDNA合成和PCR扩增的一步法RT-PCR试剂盒，用于以RNA为模板，通过特异引物合成cDNA之后，在DNA聚合酶的作用下通过PCR技术检测目标基因的含量。
产品特点：
产品组成：
保存：-20℃保存，有效期一年。
使用方法：
注意事项：
相关搜索：一步式RT-PCR Mix，One-Step RT-PCR Mix
产品特点：
- 实现一管式完成RT-PCR反应，避免样品交叉污染。
- 反应产物加入Loading Buffer后可以直接电泳检测。
- 本产品包含了cDNA合成以及PCR反应所必须的酶和反应体系，优化的Buffer体系最大程度的减少了反转录酶对扩增反应的抑制，提高了反应整体的敏感性。
- 本产品足够50次20μL体系的RT-PCR，只能用于科研目的。
产品组成：
| 组分 | 规格 |
| 一步式RT-PCR Mix,5× | 75μL |
| RT Buffer,5× | 200μL |
| DEPC-ddH2O | 1mL |
保存：-20℃保存，有效期一年。
使用方法：
- 样品RNA的制备用自选方法纯化样品的RNA，本试剂盒跟市场上大多数RNA提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的RNA提取试剂盒系列产品。
- 设置一管式RT-PCR反应（20μL体系）
在N+1个干净的无RNase的PCR管中（N=样品数，另外一个是阴性对照。用户可以设置其他对照，样品数需相应增加），按下表加入各成分：成分 阴性对照管 样品管 RNA模板（自备） 无 1-2μg 上游引物（10μM） 0.5μL 0.5μL 下游引物（10μM） 0.5μL 0.5μL RT Buffer,5× 4μL 4μL 一步式RT-PCR Mix，5× 1.5μL 1.5μL DEPC-ddH2O 至20μL - 轻柔混合均匀后放入PCR仪中进行RT-PCR。
- 设定RT-PCR反应条件时，一般将RT的条件设定成50℃ 30min，后接94℃预变性2min，94℃变性30 sec，退火50-60℃ 30 sec，延伸72℃ 1 kb/min，最后3步重复30-40个循环。终延伸72℃ 5-10min。
注意事项：
- 实验过程中请注意避免RNase污染。
- 除酶以外的各种试剂，使用之前请完全溶解并充分混匀，以防因盐离子浓度不均影响实验结果。
- RNA模板的完整性对cDNA合成效率起着决定性作用，因此请选择可靠的RNA提取/纯化方法。
- 如果扩增片段较长或者RNA结构复杂，可以将RNA单独置于65-70℃加热5-10min后再加入体系。
相关搜索：一步式RT-PCR Mix，One-Step RT-PCR Mix